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HIV检测方法与意义 
皮肤科医师之家       2013年4月28日        阅读数:1053        字体:      

HIV抗体的血清学试验分为初筛和确认试验。最常用的初筛试验和确认试验分别是酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验(WB)

一、  初筛试验

       1.1  检测原理

酶联免疫吸附试验(ELISA)。目前已经发展到第四代检测试剂。

第一代试剂主要以病毒裂解物或部分纯化的病毒抗原包被反应板,以检测血清中的抗体。由于包被的抗原不纯,假阳性率较高。第二代试剂使用基因工程方法得到的重组抗原和合成肽包被反应板,由于纯化抗原的使用,特异性有了很大提高。第三代试剂使用双抗原夹心法检测抗体,进一步提高了敏感性。第四代试剂则在第三代的基础上进一步增加了P24抗原的检测,把HIV抗原和抗P24的抗体同时包被反应板,可同时检测血清中的HIV抗体和P24抗原。

       1.2     

     血清、血浆

       1.3  临床意义

     主要用于HIV抗体的初筛检测,高危行为后,2-4周时间即可检测出HIV抗体。

二、  确认试验

       2.1  检测原理

免疫印迹试验(WB)。基本原理是HIV全病毒抗原经过SDS-PAGE电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上,将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。将待检血清样品用稀释液稀释成1/100,再把它直接加到硝酸纤维素膜上,恒温震荡,使其充分接触反应,血清中若含有抗HIV抗体,就会与膜条上的抗原带相结合。加入抗人IgG酶结合物和底物后,即可使有反应的抗原-抗体结合带呈现紫褐色,根据出现条带情况判定结果。

       2.2     

     血清、血浆

       2.3  临床意义

     目前最常用的HIV确认试验。免疫印迹试验的特异性稍差,有大约2%的假阳性率。